北柴胡UGT基因的克隆及其过量表达和RNAi转基因载体的构建

摘要：

目的:克隆北柴胡中可能参与柴胡皂苷生物合成的UGT基因,构建其过表达和抑制表达的转基因载体,为通过转基因验证其功能奠定基础.方法:在454高通量测序已获得部分cDNA序列基础上,通过RACE和LD-PCR方法扩增全长cDNA克隆.设计含有酶切位点的PCR引物,PCR扩增UGT基因的ORF和部分片段后,酶切,分别插入到pCAMBIA-SUPER1 300和pHANNIBAL中.重组的pHANNIBAL经Not(I)酶切后插入到pART27中.最终以构建出过表达和抑制表达的转基因载体.结果:扩增到了北柴胡1个UGT基因全长cDNA克隆,构建了这一基因的过表达和抑制表达转基因载体.结论:通过UGT基因的全长cDNA克隆和转基因载体构建,为后续开展转基因研究,验证其生物功能奠定了基础.

关键词：北柴胡、UGT基因、转基因载体

所属期刊栏目：37

分类号：S567.79(经济作物)

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：558-563