清醒自由活动大鼠脑酪氨酸羟化酶活性的测定

摘要：

目的:建立清醒自由活动大鼠脑内酪氨酸羟化酶(TH)活性的测定方法.方法:应用脑微透析技术收集经6-羟基多巴胺(6-OHDA)预处理的大鼠,在L-芳香族氨基酸脱羧酶抑制剂3-羟苄肼·盐酸(NSD1015)灌流下,脑纹状体细胞外的透析液;用高效液相色谱-电化学检测方法测定透析液内多巴(DOPA)水平,来反映脑内TH的活性.并观察TH抑制剂以及多巴胺受体的抑制剂和激动剂对其的影响.结果:预先用 6-OHDA处理导致大鼠纹状体透析液内DOPA缺失,用NSD1015阻断DOPA向多巴胺(DA)转化,可测得DOPA的水平,且DA的代谢产物3,4-二羟基苯乙酸水平逐步下降.但在TH抑制剂α-甲基ρ-酪氨酸作用下DOPA又可消失,说明测定的DOPA是来自多巴胺神经末梢.另外,腹腔内给予多巴胺受体激动剂盐酸阿朴吗啡后,脑透析液中DOPA水平减少;而给予多巴胺受体抑制剂氟哌啶醇后,微透析液中DOPA水平增加.本研究测得在0.01 mmol*L-1 NSD1015灌流下,经6-OHDA预处理的,插入探针24 h SD大鼠纹状体中DOPA水平为(0.39±0.12)pmol*min-1(x±s,n=5).结论:在脱羧酶抑制剂NSD 1015灌流期间,测得预先用 6-OHDA处理大鼠纹状体透析液中DOPA水平可以认为是脑组织TH活性的指数,经工具药验证,在体监测脑TH活性的方法是可靠的.

关键词：酪氨酸羟化酶、清醒大鼠、脑微透析、高效液相色谱-电化学检测法

所属期刊栏目：27

分类号：R285.5(中药学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：132-135