补骨颗粒含药血清对软骨细胞凋亡及缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子-A信号通路的影响

摘要：

目的:观察补骨颗粒含药血清对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及HIF-1α/VEGF-A信号通路的影响,探讨补骨颗粒对软骨细胞凋亡的影响机制.方法:通过体外培养大鼠膝关节软骨细胞,应用Cell Counting Kit-8方法检测不同浓度补骨颗粒含药血清对软骨细胞活性的影响.将实验分为正常培养基组及不同浓度补骨颗粒含药血清(浓度为0％,5％,10％,15％,20％,25％,30％)联合10 ng/mL IL-1β培养组.应用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶染色后经流式细胞仪检测软骨细胞凋亡影响情况,用探针(2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯)测量软骨细胞内活性氧的相对量,应用酶联免疫吸附试验检测软骨细胞HIF-1α及VEGF-A含量,应用逆转录酶定量聚合酶链式反应检测HIF-1α及VEGF-A基因表达情况.结果:浓度为5％,10％,15％补骨颗粒含药血清间的光密度(OD)值差异无统计学意义(P＞0.05),而15％含药血清干预后软骨细胞的OD值比20％含药血清干预组(P=0.007)、25％含药血清干预组(P=0.003)及30％含药血清干预组(P＜0.001)高,差异有统计学意义.应用10 ng/mLIL-1β干预后软骨细胞凋亡率和活性氧含量明显高于正常培养基组,并且15％含药血清对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的抑制率和软骨细胞中活性氧的含量高于其他浓度含药血清组,差异有统计学意义(P＜0.05).酶联免疫吸附试验检测结果表明15％和20％含药血清组HIF-1α和VEGF-A的含量差异无统计学意义(P=0.635,P=0.057);而15％和20％含药血清组的HIF-1α和VEGF-A含量显著高于正常培养基组,差异有统计学意义(P＜0.05);而显著低于0％,5％,10％,25％和30％含药血清组,差异有统计学意义(P＜0.01).逆转录酶定量聚合酶链式反应检测结果表明15％含药血清组HIF-1α和VEGF-A基因表达量显著低于0％,5％和10％含药血清组,差异有统计学意义(P＜0.05);而15％含药血清组与20％,25％和30％含药血清组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:补骨颗粒含药血清可以通过激活HIF-1α/VEGF-A信号通路而抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,并且含药血清浓度对软骨细胞的活性存在影响.

关键词：含药血清、白细胞介素-1β、软骨细胞、凋亡、缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子-A信号通路

所属期刊栏目：31

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：福建省自然科学基金资助项目2020J011191

在线出版日期：2023-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8