夏枯草黄酮对骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡的影响及作用机制研究
目的:探讨夏枯草黄酮对骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞凋亡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)通路的影响.方法:通过切断大鼠前交叉副韧带、内侧副韧带,摘除内侧半月板构建OA大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为OA组、夏枯草黄酮低、中、高剂量组和RhoA通路抑制剂(Y-27632)组;另取12只大鼠仅剪开皮肤暴露关节腔,作为假手术组;假手术组和OA组大鼠均给予生理盐水灌胃,夏枯草黄酮低、中、高剂量组分别给予6.125,12.250,24.500 mg/kg夏枯草黄酮灌胃,Y-27632组给5 mg/kg的Y-27632灌胃;1次/d,连续8周.末次给药后24 h,检测大鼠压痛阈值、热痛阈值,酶联免疫吸附法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠关节软骨形态,一步法原位末端标记(TUNEL)法检测大鼠软骨细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测大鼠软骨组织凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及RhoA/ROCK通路蛋白的表达.结果:假手术组大鼠关节软骨结构清晰,排列规整,表层光滑无缺损,各层细胞分布均匀;OA组大鼠关节软骨表层粗糙且不完整,纤维化明显,各层细胞排列紊乱;夏枯草黄酮各剂量组、Y-27632组大鼠表层结构相对正常,但部分区域仍存在细胞紊乱现象;夏枯草黄酮高剂量组与Y-27632组两组间大鼠骨关节软骨形态差异不明显.与假手术组比较,OA组大鼠压痛阈值及热痛阈值显著降低,Mankin's评分、血清TNF-α及IL-1β水平、软骨细胞凋亡数、软骨组织Caspase-3、RhoA、ROCK蛋白表达显著升高(P＜0.05);与OA组比较,夏枯草黄酮低、中、高剂量组压痛阈值及热痛阈值显著升高,Mankin's评分、血清TNF-α及IL-1β水平、软骨细胞凋亡数、软骨组织Caspase-3、Rho A、ROCK蛋白表达显著降低,且呈现夏枯草黄酮剂量依赖性(P＜0.05);夏枯草黄酮高剂量组和Y-27632组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论:夏枯草黄酮通过抑制OA大鼠软骨细胞凋亡改善大鼠关节软骨损伤,可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关.
夏枯草黄酮、骨关节炎、大鼠、软骨细胞、凋亡
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R-33(医学研究方法)
北京市科学技术委员会科研计划项目D191100000417005
2022-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1-6,11
