华蟾素诱导骨肉瘤细胞凋亡及其机制
目的:探讨华蟾素诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡的效果及其可能机制.方法:体外培养人骨肉瘤细胞系U2OS,将其分为第1,2,3,4,5组,于其培养基内分别加入0,0.5,1.0,1.5,2.0 μg/mL华蟾素,每组分别于培养的第24,48,72 h进行检测.MTT法检测各组骨肉瘤细胞生长的抑制率,TUNEI染色观察第4组细胞凋亡程度并计算其凋亡率,免疫荧光染色检测第4组凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的含量并计算其比值,RT-PCR检测Bax和Bcl-2的表达.结果:MTT试验显示,随着各组华蟾素浓度的增加,细胞生长抑制率明显增加,其中第5组48 h生长抑制率增加至(59.56±1.95)％,相当于第2组同期(22.85±1.34)％的2.5倍(P＜0.01).随着培养时间的延长,各组细胞生长抑制均有不同程度的增加,以第5组72 h最为显著.Tunel染色显示,随着华蟾素干预时间的延长,U20S细胞凋亡率显著上升,与华蟾素作用于细胞24,48时相比,作用72 h后凋亡率达到(32.35±1.57)％,凋亡率明显增加(P＜0.01).免疫荧光和RT-PCR提示,随着华蟾素作用时间的延长,第4组Bax的表达逐渐增加,而Bcl-2的表达逐渐减少,同时Bax/Bcl-2含量的比值也逐渐增加.结论:华蟾素具有抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖和诱导其凋亡的作用,其疗效呈剂量和时间依赖性,而其机制可能与华蟾素影响Bax和Bcl-2的表达有关.华蟾素具有治疗骨肉瘤的潜力,值得进一步研究探讨.
华蟾素、骨肉瘤细胞、细胞凋亡、Bax、Bcl-2
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R-33(医学研究方法)
2015-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
6-10,13
