丹参酮ⅡA对大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制探讨
目的:观察丹参酮ⅡA( TanⅡA)对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞( VSMC)增殖与迁移的影响. 方法:采用CCK8法筛选VSMC增殖的最适胎牛血清(FBS)浓度,然后将VSMC分为3组:(1)对照组:VSMC加入5%FBS培养液;(2)增殖组:VSMC加入30%FBS培养液;( 3 ) TanⅡA干预组:①10 mg/L TanⅡA+30%FBS;②20 mg/L TanⅡA +30%FBS;③40 mg/L TanⅡA+30%FBS,分别培养24、48、72 h后检测细胞增殖情况;伤口愈合实验观察VSMC迁移指数;免疫细胞化学法检测细胞血小板生长因子( PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子( bFGF)的表达变化;应用Western blot法观察细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及金属基质蛋白酶2(MMP2)、金属基质蛋白酶9(MMP9)的表达情况. 结果:与增殖组相比,TanⅡA干预后细胞增殖明显缓慢,其抑制作用呈时间、剂量依赖性,20 mg/L TanⅡA干预48 h对VSMC增殖的抑制作用比较显著,且无明显细胞损伤. 伤口愈合实验显示TanⅡA干预后VSMC的迁移指数明显低于增殖组(P<0. 05);免疫细胞化学结果显示,与增殖组相比,TanⅡA干预后PDGF表达减少,差异具有统计学意义(P<0. 05),各组间bFGF表达差异无统计学意义;Western blot结果显示,与增殖组比较,TanⅡA干预组随药物浓度的提高,Bcl-2、MMP2、MMP9表达水平降低,Bax提高,差异具有统计学意义(P<0. 05). 结论:20 mg/L TanⅡA对高浓度FBS诱导的VSMC增殖与迁移的抑制作用较为明显,且无明显细胞损伤,其抑制作用可能与调节Bcl-2、Bax表达,阻断PDGF、MMP2、MMP9生长因子活化有关.
动静脉内瘘、血管内膜增生、血管平滑肌细胞、丹参酮ⅡA、细胞增殖、迁移
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R28;R92
南京军区医学科技创新项目12MA017
2015-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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