锌指蛋白A20抑制脂多糖诱导大鼠腹膜间皮细胞NF-κB活化、CD40表达及TNF-α的分泌
目的:探讨锌指蛋白A20(zinc finger protein A20)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)炎症反应的影响.方法:分离及培养RPMCs,将细胞随机分成对照组、LPS组、转染A20组、空载体组.脂质体转染A20质粒(pGEM-T easy-A20)至RPMCs 24 h后分别在LPS刺激不同时间点收获细胞提取蛋白及细胞上清液.用Western blotting 检测细胞A20和IκBα(inhibitor of nuclear factor-κB-α)蛋白的表达;RT-PCR检测CD40和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;用ELISA法检测培养上清液TNF-α蛋白水平.结果:与LPS组及空载体组相比,转染A20组RPMCs IκBα蛋白无明显降解(P<0.05);CD40、TNF-α mRNA表达及细胞培养上清液TNF-α蛋白水平均明显降低(P<0.05);与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论:A20可抑制LPS诱导的RPMCs核转录因子-κB(NF-κB)活化及炎症反应.
大鼠、腹膜间皮细胞、锌指蛋白A20、IκBα、CD40、TNF-α
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S43;R56
浙江省自然科学基金资助项目Y2090522
2014-02-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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