circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖

摘要：

目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制.方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达.使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞.采用qPCR法检测稳定转染细胞中circSMARCA5的表达水平.通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测circSMARCA5过表达对A549和H1975细胞生物学行为的影响.通过转录组测序、KEGG和GO富集分析,确定circSMARCA5可能的靶基因.分别构建circSMARCA5过表达A549、Lewis细胞BABL/c裸鼠和免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤模型,观察circSMARCA5对裸鼠皮下移植瘤生长的影响,流式细胞术检测对Lewis细胞移植瘤组织中Treg细胞水平的影响.结果:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达(P<0.01).过表达circSMARCA5可以在体外促进NSCLC细胞的增殖(P<0.05,P<0.01).体内实验中,circSMARCA5可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01).机制上,经KEGG和GO富集分析,确定C-C趋化因子配体5(CCL5)为circSMARCA5的下游靶基因.过表达circSMARCA5组A549和H1975细胞中CCL5的表达量增加(均P<0.05).circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤的生长.C57小鼠皮下移植瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示,circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例高于对照组[(3.1±0.5)%vs(1.0±0.1)%,P<0.05].结论:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达,其可能通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中,导致肿瘤的免疫逃逸,促进NSCLC的进展.

关键词：非小细胞肺癌、circSMARCA5、C-C趋化因子配体5、Treg细胞

所属期刊栏目：30

分类号：R734.2;R730.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;南京中医药大学自然科学基金项目

在线出版日期：2023-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：586-593