基于PiggyBac转座系统的CD19-CAR载体的构建及功能鉴定

摘要：

目的:开发基于PiggyBac(PB)转座系统的电转染CAR-T细胞制备方法并鉴定其体外抗肿瘤功能.方法:采用健康人外周血单个核细胞(PBMC)制备T细胞,通过分子克隆技术将CD19基因克隆到PB质粒(转座子)中后经电转染法将转座子和转座酶质粒导入激活的T细胞中,并测定其转染效率,最后运用流式细胞术及荧光素酶发光实验评估其对人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞的杀伤能力.结果:电转染制备的CD19 CAR-T细胞转染效率较高(＞60％),呈剂量依赖性,且CAR-T细胞相对于Pan-T细胞对Raji细胞杀伤能力显著(P＜0.05).结论:开发的PB转座系统的电转染方法可行,在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤能力,具备临床运用于CD19 CAR-T细胞制备的潜力.

关键词：CAR-T细胞、CD19、PB转座系统、电转染、淋巴瘤、Raji细胞

所属期刊栏目：30

分类号：Q78;R730.51(基因工程（遗传工程）)

资助基金：北京市双一流高层次人才科研启动经费资助项目;北京中医药大学新教师启动基金资助项目

在线出版日期：2023-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：156-160