IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察

摘要：

目的:通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征(CRS)模型的方法.方法:构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞.通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性,ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平;经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型,流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量,H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化.结果:经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12,CAR阳性率达(56.9±5.4)％;与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时,均能高分泌IFN-γ.成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,经小鼠尾静脉注射1×106个mCD19/IL-12-CAR-T细胞能显著抑制移植瘤的生长,但未能诱发严重CRS;输注2×106个mCD19/IL-12-CAR-T细胞后,小鼠出现体质量减轻、血清炎性因子水平升高、组织损伤,最终导致死亡等一系列典型CRS表现.结论:成功构建IL-12-CAR-T细胞诱发的小鼠CRS模型,其稳定性好、重复性高,具有广泛的应用前景.

关键词：嵌合抗原受体、白细胞介素-12、CAR-T细胞疗法、细胞因子释放综合征、胰腺癌细胞

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分类号：R730.51;R735.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省中医院高峰学术人才培养工程;医学免疫学国家重点实验室开放课题;江苏省中医药科技发展计划项目;江苏省研究生科研与实践创新计划项目

在线出版日期：2023-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：28-34