肺腺癌穿膜蛋白125通过高甲基化介导NF-κB信号通路的激活降低对地西他滨的敏感性

摘要：

目的:探讨穿膜蛋白125 (transmembrane protein 125,TMEM125)在肺腺癌组织与A549细胞中的表达,以及影响细胞的增殖和侵袭能力的分子机制.方法:从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库收集肺腺癌数据包,下载临床信息及基因表达谱数据.分析TMEM125在肺腺癌组织中的表达及其与患者总生存期的相关性.构建TMEM125过表达A549细胞株,以CCK-8法、细胞划痕实验检测TMEM 125过表达对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响;流式细胞术检测TMEM125过表达对A549细胞的细胞周期和凋亡的影响.WB检测TMEM125过表达对下游NF-κB信号通路、凋亡蛋白的影响;免疫共沉淀法(co-immunoprecipitation,Co-IP)检测TMEM125与NF-κB抑制因子结合Ras样2(NF-κB inhibitor interacting Ras-like 2,NKIRAS2)的相互作用.利用TNFα(10 ng/ml)处理TMEM125过表达A549细胞,CKK-8、流式细胞术及WB检测其对细胞增殖、凋亡以及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响.去甲基化试剂地西他滨处理A549细胞,qPCR和WB检测TMEM125基因和蛋白的表达.结果:TMEM125 mRNA在肺腺癌组织中表达水平显著低于正常组织(P＜0.001),启动子甲基化水平显著高于正常组织(P＜0.001),并且低、中表达患者总生存期显著低于高表达患者(P＜0.001).过表达TMEM125抑制了A549细胞的增殖和迁移(P＜0.01),增加细胞G2/M期,促进细胞凋亡(P＜0.01);过表达TMEM 125与NKIRAS2相互作用,显著抑制NF-κB的活性(P＜0.01);地西他滨处理A549细胞可促进TMEM125表达并且抑制细胞增殖(P＜0.01).结论:启动子高甲基化水平降低了TMEM125基因表达,导致其抑制NF-κB活性功能和抑制细胞增殖的作用下降,并且降低了细胞对地西他滨的敏感性.

关键词：穿膜蛋白;TMEM125;肺腺癌;A549细胞;甲基化;NF-κB

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分类号：R730.54;R734.2(肿瘤学)

资助基金：海南省卫生健康行业科研资助项目No.19A200014

在线出版日期：2022-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：998-1004