胃癌组织中高表达的miR-504通过TP53INP1调控胃癌细胞BGC-823的生物学行为

摘要：

目的:探究微小RNA-504(miRNA-504)在胃癌(GC)组织中的表达水平及其对GC细胞生物学行为的调控机制.方法:收集2020年6月至2020年12月期间三亚中心医院外科收治的48例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qPCR检测组织中miR-504、肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1(tumor protein 53-induced nuclear protein 1,TP53INP1)mRNA的水平,WB法检测TP53INP1水平.体外培养人胃癌细胞BGC-823,分为对照组(正常培养的BGC-823细胞)、miR-504mimic组、mimic-NC组、miR-504 inhibitor组、inhibitor-NC组、miR-504 inhibitor+si-NC组、miR-504 inhibitor+si-TP53INP1组,qPCR检测细胞中miR-504和TP53INP1 mRNA的表达,MTT法、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力,WB法检测各组细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白(CyclinD1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9)以及TP53INP1的表达.双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-504与TP53INP1 mRNA的靶向关系.结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-504的表达显著升高(P＜0.05),而TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01),miR-504和TP53INPmRNA两者的表达呈负相关(P＜0.01).与对照组相比,miR-504mimic组BGC-823细胞中miR-504的表达显著升高(P＜0.05)、TP53INP1 mRNA和蛋白的表达显著降低(均P＜0.05),且细胞增殖率、划痕愈合率、侵袭入Transwell小室下层的细胞数量,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达均显著增加,细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达均显著降低(均P＜0.05).转染miR-504inhibitor能显著下调BGC-823中miR-504的表达、上调TP53INP1 mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖、迁移与侵袭能力而促进细胞凋亡(均P＜0.05);而下调TP53INP1的表达可明显减弱miR-504下调对BGC-823细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(P＜0.01).miR-504高表达能明显抑制野生型TP53INP1质粒的荧光素酶活性(P＜0.05).结论:miR-504在胃癌组织中呈高表达,下调miR-504可抑制胃癌BGC-823细胞的恶性生物学行为而促进其凋亡,其作用机制可能与靶向调控TP53INP1的表达有关.

关键词：胃癌;BGC-823细胞;miRNA-504;增殖;凋亡;迁移;侵袭;肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1

所属期刊栏目：28

分类号：R735.2;R730.2(肿瘤学)

资助基金：海南省卫生计生行业科研项目资助;三亚市医疗卫生科技创新项目资助

在线出版日期：2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：824-832