自杀基因作为一种“安全性开关”控制CAR-T细胞毒性的临床前研究

摘要：

目的:探讨小分子化学诱导药AP1903能否在体内外终止过表达iCasp9自杀基因的CD19靶向嵌合抗原受体修饰T(CD19CAR-T)细胞毒性功能.方法:构建过表达iCasp9的CD 19CAR-T(iCasp9-CD19CAR-T)细胞并和AP1903共孵育,采用流式细胞术检测细胞表型及凋亡的方法,分别在K562和T细胞上验证iCasp9/CID自杀基因系统,在体内(观察荷Raji细胞移植瘤NCG小鼠的生存率)和体外(流式细胞术检测细胞的杀伤功能)检测AP1903给药情况下iCasp9-CD19CAR-T细胞的杀伤功能.结果:和CD 19CAR-T细胞相比,iCasp9-CD19CAR-T细胞的增殖能力、表型及体内外杀伤功能均无显著差异(均P＞0.05).AP1903给药2h后双表达iCasp9和CD 19CAR的K562和T细胞分别有(33.8±0.9)％和(27.95±0.35)％的细胞出现凋亡,AP1903给药24 h后双表达iCasp9和CD19CAR的K562和T细胞均已经全部死亡.检测AP1903给药和未给药两种条件下的iCasp9-CD19CAR-T细胞体外杀伤效率,前者明显低于后者(P＜0.01);iCasp9-CD 19CAR-T细胞治疗荷Raji细胞移植瘤NCG小鼠,其60d生存率同样是AP1903给药的明显低于未给药的(P＜0.01).结论:小分子化学诱导药物AP1903能在体内外有效终止iCasp9-CD19CAR-T细胞毒性功能.

关键词：嵌合抗原受体修饰T细胞、CD19、安全性开关、诱导性自杀基因caspase9、细胞因子释放综合征、脱靶效应、K562细胞

所属期刊栏目：28

分类号：R739.12;R730.51(肿瘤学)

资助基金：山东省重点研发计划资助项目No.2016ZDJS07B05

在线出版日期：2021-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：225-231