miR-449b-5p通过靶向Cyclin E2抑制卵巢癌细胞生长和细胞周期进展

摘要：

目的:探讨miR-449b-5p对卵巢癌细胞生长的作用和机制.方法:选取2018年6月至2020年6月于四川省人民医院妇产科接受手术的20例卵巢癌患者的癌组织和癌旁组织,以及正常卵巢上皮细胞系HOSEpiC和6种人宫颈癌细胞系SKOV3、ES-2、OVCAR-3、HO8910、CaOV-3和 A2780,用 qPCR 检测卵巢癌组织和细胞中 miR-449b-5p 与 CCNE2 mRNA 的表达.将 miR-NC、miR-499b-5p mimic、miR-499b-5p inhibitor、pc-CCNE2质粒分别或联合转染进入 SKOV3细胞,通过 CCK-8法测定细胞生长,流式细胞术检测细胞周期,WB法检测CCNE2蛋白的表达.双荧光素酶报告实验验证miR-449b-5p与CCNE2的靶向关系.裸鼠皮下注射转染miR-499b-5p mimic的SKOV3细胞悬液构建移植瘤模型,每周检测移植瘤体积,第42天处死,电子天平称皮下肿瘤重量,免疫组化法检测移植瘤组织中CCNE2和Ki67的表达.结果:与正常卵巢组织和上皮细胞系HOSEpiC相比,miR-499b在人宫颈癌组织和细胞系SKOV3、ES-2、OVCAR-3、HO8910、CaOV-3和A2780中表达明显下调(P＜0.01).与Control组相比,miR-499b mimic组SKOV3细胞增殖明显受到抑制(P＜0.01),G0/G1期细胞比例明显升高(P＜0.01);miR-499b inhibitor 组 SKOV3细胞增殖水平升高(P＜0.01),G0/G1 期细胞比例明显降低(P＜0.01).miR-499b-5p 高表达明显抑制了含有野生型CCNE2质粒的荧光素酶活性(P＜0.01),但对突变型CCNE2质粒的荧光素酶活性无影响.与miR-499bmimic组相比,miR-499b mimic+pc-CCNE2组SKOV3细胞生长明显增加(P＜0.01),G0/G1期细胞比例明显降低(P＜0.01).与miR-NC组相比,miR-499b mimic组裸鼠移植瘤体积明显变小(P＜0.01),瘤质量明显减轻(P＜0.01),CCNE2和Ki67阳性细胞明显减少(P＜0.01).结论:miR-449b-5p通过靶向Cyclin E2抑制卵巢癌细胞生长和细胞周期进展.

关键词：miR-449b-5p、Cyclin E2、卵巢癌、生长、细胞周期

所属期刊栏目：28

分类号：R737.31;R730.54(肿瘤学)

资助基金：四川省卫生和计划生育委员会资助项目No.18PJ485

在线出版日期：2021-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：143-150