奥沙利铂促进过表达GSDME的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡

摘要：

目的:观察过表达Gasdermin蛋白E(gasdermin E,GSDME)基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦亡的现象.方法:通过qPCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表达野生型和突变型GSDME的GSDME-WT和GSDME-D270A重组质粒,包装为相应慢病毒后感染Lovo细胞构建GSDME稳定高表达细胞株,Western blotting检测WT、D270A和空载体组中GSDME表达水平.用不同浓度奥沙利铂(0、4、8、16、32、64μg/ml)作用于WT、D270A组Lovo细胞和HCOEPIC细胞,显微镜下观察细胞的形态变化.结果:GSDME在HCOEPIC细胞中表达显著高于Lovo细胞(P<0.01).成功构建GSDME-WT和GSDME-D270A高表达重组质粒和相应的Lovo细胞株,与空载体组相比,WT和D270A组Lovo细胞中GSDME表达水平明显升高(均P<0.05).镜下观察发现,64μg/ml奥沙利铂处理各组细胞9和12 h时,WT组的Lovo细胞和HCOEPIC细胞体积逐渐增大并向一侧"吹泡",表现出明显的细胞焦亡现象,细胞焦亡率显著高于无奥沙利铂处理的对照组[Lovo细胞:(7.405±1.010)％vs(3.441±0.401)％,P<0.05;HCOEPIC细胞:(7.203±1.020)％vs(4.201±0.302)％,P<0.05].结论:奥沙利铂促进过表达GSDME基因的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡.

关键词：细胞焦亡、GSDME、奥沙利铂、结直肠癌、生物标志物

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分类号：R735.3;R730.5(肿瘤学)

资助基金：天津市卫生计生委、天津市中医药管理局重点项目;国家重点实验室开放研究课题项目;天津市科技支撑重点研发计划项目

在线出版日期：2020-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：884-888