lncRNA LUCAT1通过靶向调控miR-199a-5p/HIF-1α促进肾透明细胞癌786-O细胞的增殖和迁移

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制.方法:选取2013年6月至2017年6月宜昌市第一人民医院泌尿外科行手术切除的40例ccRCC患者癌组织及相应的癌旁组织样本,组织均经病理检查诊断明确.ccRCC细胞株786-O、ACHN、UM-RC-2及正常肾上皮细胞系KiMA培养完成后,用qPCR法检测ccRCC组织和细胞株中miR-199-a-5p、HIF-1α和LUCAT1TmRNA的表达,用CCK-8实验检测786-O细胞的增殖能力,Transwell法检测786-O细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验验证LUCAT1与miR-199a-5p的靶向作用关系,Westem blotting实验检测LUCAT1、miR-199a-5p对HIF-1α蛋白表达的影响.结果:LUCAT1在ccRCC组织和细胞系786-O、ACHN和UM-RC-2中呈高表达(均P＜0.01),敲低LUCAT1后可明显抑制786-O细胞的增殖和迁移(均P＜0.01).miR-199a-5p在ccRCC组织和细胞系中呈低表达(均P＜0.01),StarBase数据库分析结果显示LUCAT1含有miR-199a-5p的保守目标位点,miR-199a-5p对LUCAT1-Wt的报告活性具有明显的抑制作用(P＜0.01);敲低LUCAT1可明显降低miR-199a-5p的表达(P＜0.01).LUCAT1在转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中呈低表达,但在LUCAT1+miR-199a-5p模拟物共转染的786-O细胞中出现逆转(P＜0.05或P＜0.01).转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中HIF-1 αmRNA和蛋白表达水平升高,而LUCAT1过表达可逆转该效应(P＜0.05或P＜0.01).转染miR-199a-5p模拟物抑制786-O细胞的增殖和迁移,而转染LUCAT1可部分消除转染miR-199a-5p模拟物对786-O细胞增殖和迁移的影响(P＜0.05或P＜0.01).结论:lncRNA LUCAT1通过靶向调节miR-199a-5p/HIF-1α的表达从而在ccRCC中发挥促癌效应.

关键词：长链非编码RNA、肺癌相关转录物1、miR-199a-5p、HIF-1α、肾透明细胞癌、786-O细胞、增殖、迁移

所属期刊栏目：27

分类号：R737;R730.5(肿瘤学)

资助基金：三峡大学教学研究重点项目No.J2017056

在线出版日期：2020-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：273-281