Lin28对肝癌HepG2细胞5-Fu敏感性的影响及其分子机制

摘要：

目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制.方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用qPCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化并计算5-Fu对细胞作用的IC50,流式细胞术检测5-Fu处理后细胞凋亡情况、WB法检测凋亡相关蛋白的表达变化,qPCR法检测转染后耐药相关miRNA(let-7a和let-7b)及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的mRNA表达水平.结果:与空载对照组(HepG2/Vector)相比,HepG2/Lin28组细胞中Lin28 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P＜0.05或P＜0.01),过表达Lin28可显著抑制HepG2细胞对5-Fu作用的敏感性(IC50明显升高,P＜0.05)和增强细胞增殖活性、使细胞凋亡率和凋亡相关蛋白caspase-3表达明显降低(均P＜0.01).与阴性对照组(si-control)相比,si-Lin28细胞中Lin28表达水平显著下降(P＜0.01);敲减Lin28可使细胞增殖活性及5-Fu的IC50显著降低(均P＜0.01),凋亡率及凋亡蛋白表达明显增加(P＜0.01).与HepG2/Vector组比较,HepG2/Lin28细胞中let-7a、let-7b及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的表达水平明显上调(均P＜0.01),而si-Lin28细胞中let-7a、let-7b及Oct4、Nanog、 Sox2的表达水平较si-control组明显下调(均P＜0.01).结论:Lin28可通过调节miRNAs的表达及肿瘤干细胞的形成从而调节肝癌HepG2细胞对化疗的敏感性,靶向调节Lin28表达有望成为提高肝癌化疗疗效的手段.

关键词：肝细胞癌、HepG2细胞、Lin28、5-氟尿嘧啶、化疗敏感性、肿瘤干细胞、凋亡

所属期刊栏目：27

分类号：R735.7;R730.5(肿瘤学)

资助基金：福建省中青年教师教育科研资助项目No.JA15193

在线出版日期：2020-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：261-266