10.3872/j.issn.1007-385x.2020.03.005
涎腺腺样囊性癌来源外泌体促进成纤维细胞PD-L1表达
目的:研究涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)来源的外泌体(exosome,EXO)对成纤维细胞PD-L1分子表达的影响.方法:通过EXO分离试剂盒提取SACC-83细胞系来源的外泌体并以电镜鉴定其颗粒大小、密度和表型;使用PKH67荧光标记后将EXO与成纤维细胞HPLF共孵育,以共聚焦显微镜观察EXO可否被HPLF细胞摄取;将EXO与HPLF细胞共孵育后,全转录组测序检测筛查该细胞中差异表达基因,GO分析结合KEGG富集分析阐明差异表达基因涉及的生物学功能和相关信号通路;使用qPCR、Western blotting和流式细胞术检测肿瘤EXO对HPLF细胞中PD-L1、LAG3和IDO1在mRNA与蛋白水平表达的影响.结果:SACC-83细胞源EXO特异性表达CD63、CD81和TSG101分子,并可被HPLF细胞内吞摄取;EXO处理HPLF细胞后,细胞中PD-L1分子显著上调表达(Fold change=10.19),差异基因显著富集于TNF、NF-κB、cGAS-String等免疫反应信号通路;体外实验证明EXO可以从mRNA和蛋白水平显著促进HPLF细胞中PD-L1的表达(24.7±4.75 vs l.03±0.11,P<0.05).结论:涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞来源EXO可以促进HPLF细胞中免疫检查点配体PD-L1的表达.
涎腺腺样囊性癌、SACC-83细胞、肿瘤微环境、癌症相关成纤维细胞、HPLF细胞、外泌体、PD-L1
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R730.3;R739.8(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目No.81602497
2020-06-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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