Thy-1通过调控Notch1通路促进肝癌细胞EMT进程

摘要：

目的:探索细胞表面抗原Thy-1通过调控Notch1通路促进肝癌HepG2和MHCC-97细胞上皮间质转化(EMT).方法:选用具有高转移特性的MHCC-97细胞和低转移特性的HepG2细胞作为研究对象,WB检测细胞内Thy-1、Notch1蛋白表达水平.用重组慢病毒转染MHCC-97和HepG2细胞,构建高表达与低表达Thy-1蛋白的细胞,再分别用Notch1激动剂rhNF-κB(1 gsu/ml)和Notch1抑制剂MW167(100μmol/L)处理细胞24 h.Transwell实验检测Thy-1表达变化、rhNF-κB和MW167处理对细胞侵袭能力的影响,qPCR检测对Notch1 mRNA表达的影响,WB实验检测细胞内EMT相关蛋白表达的影响.结果:MHCC-97细胞中Thy-1、Notch1蛋白表达量均高于HepG2细胞(P<0.05).成功构建Thy-1过表达的HepG2细胞和Thy-1低表达的MHCC-97细胞.与亲本HepG2细胞相比,Thy-1过表达HepG2细胞侵袭能力显著增强[(475.78±80.37)vs(183.23±55.34)个,P<0.05)]、波形蛋白表达显著升高(P<0.05)、上皮钙黏素蛋白表达显著降低(P<0.05)、Notch1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与亲本MHCC-97细胞相比,Thy-1沉默的MHCC-97细胞侵袭能力显著降低[(237.44±62.18)vs(543.56±77.94)个,P<0.05)]、波形蛋白表达显著降低(P<0.05)、上皮钙黏素蛋白表达显著升高(P<0.05)、Notch1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05).而Notch1激活剂或抑制剂处理上述肝癌细胞可逆转由于Thy-1沉默或过表达所造成的改变.结论:Thy-1可通过调控Notch1表达影响肝癌HepG2和MHCC-97细胞的EMT.

关键词：肝癌、HepG2细胞、MHCC-97细胞、Thy-1、细胞表面抗原、Notch1通路、转移、上皮间质转化

所属期刊栏目：26

分类号：R735.7;R730.2(肿瘤学)

资助基金：兰州市科技局指导项目资助2018-ZD-13

在线出版日期：2019-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1189-1195