miR-760在宫颈鳞状细胞癌组织和细胞中的表达及其对SiHa细胞恶性生物学行为的作用

摘要：

目的:探讨微小RNA(miR)-760在人宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织和细胞中的表达及其对SiHa细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移、EMT影响的分子机制.方法:选用2015年4月至2018年8月山东省聊城市妇幼保健院妇科手术切除、经病理确诊的80例CSCC组织及相应的癌旁组织标本和40例子宫肌瘤切除术获取的正常宫颈组织标本,应用qPCR检测CSCC组织、癌旁组织和正常宫颈组织、人CSCC细胞系SiHa、HCC94和人宫颈鳞状上皮永生化细胞株H8中miR-760的表达水平,分析miR-760表达与CSCC患者临床病理特征的相关性.用脂质体转染法,将miR-760 mimics和NC-mimics质粒分别转染至SiHa细胞,用qPCR检测SiHa细胞中miR-760的表达,用CCK-8实验和流式细胞术分别检测SiHa细胞增殖能力和凋亡水平,用Transwell实验检测SiHa细胞的侵袭和迁移能力,WB检测SiHa细胞EMT相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化.用生物学信息法预测FOXA1与miR-760的靶向关系,用双荧光素酶报告基因验证miR-760对FOXA1的直接靶向调控作用.结果:CSCC组织中miR-760表达明显低于癌旁组织及正常宫颈组织(均P<0.01),miR-760表达与患者淋巴结转移和临床分期密切相关(均P<0.01).SiHa、HCC94细胞中miR-760的表达明显低于H8细胞(均P<0.01).通过转染miR-760 mimics上调miR-760表达,能够显著抑制SiHa细胞的增殖能力和侵袭、迁移能力(均P<0.01)、促进其凋亡(P<0.01),并上调E-cadherin的表达(P<0.01)、下调vimentin和N-cadherin的表达(均P<0.01).FOXA1是miR-760的直接靶基因(P<0.01),上调miR-760表达显著抑制SiHa细胞中FOXA1 mRNA和蛋白的表达(均P<0.05).结论:在CSCC组织和细胞中miR-760低表达,其通过靶向作用FOXA1基因调控SiHa细胞的增殖、侵袭、迁移并促进凋亡,同时影响癌细胞的EMT进程.

关键词：宫颈鳞状细胞癌、SiHa细胞、miR-760、FOXA1、增殖、侵袭、迁移、凋亡

所属期刊栏目：26

分类号：R737.33;R730.2(肿瘤学)

资助基金：山东省医药卫生科技发展计划资助项目2016WS0583

在线出版日期：2019-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1120-1127