外泌体介导的Let-7a通过下调MYC表达抑制三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为

摘要：

目的:探讨外泌体(EXO)传输Let-7a调控MYC基因在三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物学行为中的作用及其机制.方法:TNBC细胞MDA-MB-231培养完成后,qPCR实验检测TNBC组织和细胞中MYC与Let-7a mRNA的表达水平,WB实验检测MYC与Let-7a蛋白的表达水平.携Let-7a重组慢病毒和敲除MYC的Crisper/Cas-9系统分别转染MDA-MB-231细胞,MTT、Transwell、划痕愈合实验检测MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移能力.荧光素酶活性实验验证MYC和Let-7a的作用靶点.分别在野生型和过表达Let-7a的MDA-MB-231细胞中分离EXO,并以透射电镜和WB实验鉴定.qPCR、WB、MTT、Tran-swell等实验检测两种EXO分别和MDA-MB-231细胞共孵育后Let-7a通过EXO影响MDA-MB-231细胞的生物学功能.结果:Let-7a与MYC在TNBC组织和细胞系中表达呈负相关(P<0.05);MYC促进MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭,Let-7a可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭(均P<0.01).Let-7a通过作用于MYC基因的3'UTR使其沉默,从而减少MYC蛋白的表达(P<0.05).Let-7a由EXO包裹运输至肿瘤细胞,进而抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05).结论:EXO介导的Let-7a通过作用于MYC基因3'UTR区使得MYC基因沉默,从而抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭.

关键词：三阴性乳腺癌、MDA-MB-231细胞、外泌体、Let-7a、MYC、恶性生物学行为

所属期刊栏目：26

分类号：R392.12;R737.9

资助基金：国家中医药管理局基金资助项目No. 20140814.Project supported by the Grants from National Administration Bureau of Chinese Medicineand Herbs 20140814

在线出版日期：2019-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：962-968