10.3872/j.issn.1007-385x.2019.08.003
lncRNA NEAT1通过抑制DNA损伤促进肺腺癌PC-9细胞的增殖
目的:研究长链非编码RNA核富集转录体1(lncRNA NEAT1)对肺腺癌PC-9细胞增殖能力的影响,并初步探讨其作用机制.方法:qPCR检测人肺腺癌PC-9细胞与人胚肺二倍体2BS细胞中lncRNA NEAT1的表达水平;设计并合成lncRNANEAT1的小干扰RNA (siRNA)序列,采用脂质体法转染PC-9细胞,通过qPCR检测转染前后PC-9细胞NEAT1的表达水平.MTT法、流式细胞术分别检测lncRNA NEAT1敲低对PC-9细胞增殖及细胞周期的影响;WB检测转染前后DNA损伤相关蛋白,即共济失调毛细血管扩张突变蛋白(ATM)和双链DNA损伤标志物γ-H2AX的表达水平.结果:与2BS细胞相比,PC-9细胞中lncRNA NEAT1呈高表达(P<0.05).成功建立NEAT1敲低的PC-9细胞,转染siRNA 12 h后siNEAT1-1及siNEAT 1-2干扰组细胞增殖能力较空白对照组及空转染组明显下降(P<0.05);干扰组细胞周期被阻滞在G1期[(88.97±2.64)%,(88.15±1.48)% vs(84.5±1.72)%,P<0.05]和G2/M期[(8.35±2.02)%,(8.11±1.36)% vs (4.28±1.28)%,P<0.05];干扰组细胞中DNA损伤相关蛋白ATM和γ-H2AX表达水平显著升高(均P<0.05).结论:lncRNA NETA1在肺腺癌PC-9细胞呈高表达,其可通过抑制DNA损伤导致细胞周期G1/M期转变促进肺腺癌细胞PC-9的增殖能力.
长链非编码RNA、核富集转录体1、DNA损伤、肺腺癌、PC-9细胞、增殖、细胞周期
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R734.2;R730.2;R730.59(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81871894;河北省自然科学基金资助项目H2018206318
2019-10-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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