过表达PRRX1通过p53介导的线粒体凋亡途径诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡

摘要：

目的:探讨配对相关同源框1蛋白(PRRX1)过表达对肝癌SMMC7721细胞凋亡的影响及其分子机制.方法:分别用慢病毒介导PRRX1过表达载体(pGMLV-PRRX1)、空载质粒(Vector)感染人肝癌SMMC7721细胞,用qPCR和WB实验检测慢病毒感染后细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达变化,用CCK-8法、Annexin-V FITC/PI染色流式细胞术分别检测PRRX1过表达对SMMC7721细胞增殖、凋亡的影响,用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10染色法)检测细胞线粒体膜电位变化,用caspase活性检测试剂盒(分光光度法)测定细胞中caspase-8和caspase-9酶活性,用WB实验检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Fas、Cleaved-caspase-3以及线粒体和细胞质中细胞色素C(Cty C)蛋白的表达.结果:成功构建PRRX1过表达的SMMC7721细胞株,感染细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达水平显著升高(均P＜0.01).与对照组和空载组比较,PRRX1过表达组SMMC7721细胞的增殖能力显著下降、细胞凋亡率显著增高、Cleaved-caspase-3剪切水平显著升高、线粒体膜电位显著下降、线粒体中Cty C蛋白表达下调、胞质中Cty C蛋白表达上调以及caspase-9酶活性升高(P＜0.05或P＜0.01),同时p53和Bax蛋白表达增加而Bcl-2蛋白表达降低(均P＜0.05),但Fas蛋白表达及caspase-8酶活性无显著变化(均P＞0.05).结论: PRRX1过表达可诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡,其机制可能与p53介导的线粒体凋亡途径被激活有关.

关键词：配对相关同源框1蛋白、肝癌、SMMC7721细胞、p53、线粒体、凋亡

所属期刊栏目：26

分类号：R392.12;R735.7

资助基金：东莞市社会科技发展一般项目资助2018507150011277

在线出版日期：2019-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：662-668