miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响

摘要：

目的:探讨miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响,并研究其可能的作用机制.方法:选取90例在河北医科大学第四医院通过手术切除的食管癌组织标本,并收集正常食管永生化上皮细胞和食管癌细胞系,应用qPCR实验检测癌组织和细胞系miR-1269a的表达水平.将miR-1269a的mimics和inhibitor分别转染食管癌细胞KYSE30后,用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测miR-1269a对KYSE30细胞增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响.通过生物信息学软件预测miR-1269a的靶基因,并通过WB实验和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269a对靶基因的调控作用.转染SOX6质粒后,采用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测SOX6对KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响,并利用回复实验进一步验证结果.结果:食管癌组织中miR-1269a的表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.05);与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞系中miR-1269a的表达水平显著升高(P＜0.05或P＜0.01).miR-1269a mimics转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著高于mimics NC组(P＜0.05或P＜0.01);inhibitor转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著低于inhibitor NC组(P＜0.05或P＜0.01).miR-1269a可与SOX6的3’UTR区相结合,且过表达miR-1269a后,KYSE30细胞的SOX6表达水平和荧光素酶报告基因的活性均显著降低(P＜0.05).回复实验表明,高表达miR-1269a可以促进食管癌细胞增殖、侵袭和迁移(P＜0.05或P＜0.01),同时高表达SOX6后,miR-1269a的促进作用出现部分逆转.结论:miR-1269a在食管癌组织和细胞系中表达上调,能够促进KYSE30细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成等恶性生物学行为,其机制可能是通过抑制靶基因SOX6实现的.

关键词：食管癌、miR-1269a、KYSE30细胞、SOX6基因、增殖、迁移、侵袭

所属期刊栏目：26

分类号：R392.12;R735.1

资助基金：国家自然科学基金资助项目81772550;河北省科技计划基金资助项目162777138

在线出版日期：2019-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：623-631