活化T细胞核因子5对人胃癌MGC803细胞增殖及凋亡能力的影响

摘要：

目的:探讨活化T细胞核因子5 (nuclear factor 5 0f activatedT cells,NFAT5)对人胃癌MGC803细胞增殖及凋亡能力的影响及其可能的机制.方法:设计并合成3条靶向NFAT5基因的siRNA(siRNA2567、siRNA2714和siRNA4562)及1条与NFAT5基因无同源性的阴性对照siRNA(NC-siRNA),脂质体介导转染人胃癌MGC803细胞后,采用Real-time PCR检测分析细胞中NFAT5 mRNA表达水平的变化,进而筛选出有效抑制NFAT5基因表达的siRNA (NFAT5-siRNA).NFAT5-siRNA转染MGC803细胞48 h后,进一步采用Real-time PCR和Western blotting验证并检测细胞中NFA T5和S100A4mRNA及蛋白表达水平的变化,流式细胞术和CCK-8法分析抑制NFAT5表达对细胞增殖及凋亡的影响.结果:转染siRNA2567对NFAT5 mRNA的表达抑制最为明显(P＜0.01),siRNA2567被验证为NFAT5-siRNA.转染NFAT5-siRNA 48 h后,NFA T5和S100A4 mRNA及蛋白的表达水平均明显降低(P＜0.05);与NC-siRNA组相比较,NFAT5-siRNA组MGC803细胞的增殖率在72 h和96 h均显著降低(P＜0.01);NFAT5基因沉默48h后,MGC803细胞的凋亡率由(2.7±0.2)％上升至(7.9±0.2)％(P＜0.01).结论:NFAT5-siRNA能有效沉默人胃癌MGC803细胞中NFAT5基因表达,在抑制细胞增殖率的同时能够有效促进细胞凋亡,该作用可能通过调控S100A4表达实现.

关键词：胃癌、MGC803细胞、NFAT5基因、S100A4基因、增殖、凋亡

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分类号：R730.51;R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81803855;辽宁省教委高等学校科研基金资助项目L201614

在线出版日期：2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1119-1124