磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI介导靶向自杀基因联合磁流体热疗对肝癌移植瘤的抑制作用

摘要：

目的:探讨磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI介导靶向自杀基因联合磁流体热疗对肝癌移植瘤的特异性杀伤作用.方法:亚克隆基因重组法构建靶向肝癌的自杀基因p[HRE]AFP-HSVTK和肿瘤细胞成像报告基因载体p[HRE]AFP-Luc,并用限制性内切酶凝胶电泳法检测重组质粒是否构建成功.共沉淀法制备Fe3O4纳米粒并以聚乙烯亚胺(PEI)修饰后得到磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI,将其作为肿瘤基因治疗的载体和磁流体热疗的介质,并利用透射电镜、粒径仪、傅里叶转换红外光谱等对Fe3O4@PEI进行表征鉴定.利用小动物活体成像仪检测Fe3O4@PEI系统运送报告基因p[HRE]AFP-Luc至荷瘤裸鼠后的生物发光信号.p[HRE]AFP-HSVTK/Fe3O4@PEI作用于肝癌细胞后,以MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡细胞比例,动物实验验证体内肿瘤生长速度及瘤体质量抑制效果,并用透射电镜分析肿瘤组织的亚细胞结构.结果:成功构建磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI以及重组载体p[HRE]AFP-HSVTK和p[HRE]AFP-Luc,经尾静脉注射Fe3O4@PEI运送的p[HRE]AFP-Luc后,活体成像系统显示仅能在裸鼠肿瘤组织检测到明显的成像信号,其主要器官病理组织分析无明显病理损伤.在体外肿瘤细胞杀伤试验中,联合治疗组细胞增殖抑制率分别高于磁流体热疗组和基因治疗组[(76.02±7.33)％ vs (42.31±4.28)％、(47.76±4.8 1)％,均P＜0.05],联合治疗组瘤细胞的凋亡率高于单独热疗组和基因治疗组[(34.05±3.41)％ vs (14.41±1.55)％、(11.64±1.20)％,均P＜0.01].体内治疗实验显示,联合治疗组移植瘤体积增长明显减慢甚至下降,瘤块质量显著小于其他单独治疗组(P＜0.05);瘤块细胞亚结构出现明显的凋亡形态.结论:自杀基因p[HRE]AFP-HSVTK对肝癌细胞具有选择性杀伤作用,Fe3O4@PEI可以作为有效的基因治疗载体和磁流体热疗的介质,其介导的肝癌靶向治疗联合磁流体热疗能特异地抑制肝癌移植瘤.

关键词：磁性纳米颗粒、Fe3O4@PEI、靶向基因治疗、磁流体热疗、联合治疗

所属期刊栏目：25

分类号：R73-36+2;R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然基金青年项目资助81501525

在线出版日期：2018-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：913-919