抗CD19嵌合受体修饰的NK-92细胞的构建及其对CD19阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤作用

摘要：

目的:构建表达CD19的二代CAR-NK-92细胞系,探讨其对CD19阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的特异性杀伤作用.方法:构建表达CD19-CAR基因的载体并包装慢病毒颗粒,感染NK-92细胞,流式细胞术检测感染率,并进一步分选阳性细胞,Western blotting检测CD19-CAR在NK-92细胞中的表达;以CD19阴性骨髓瘤细胞U-266、CD19阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞ARH-77和HS-Sultan细胞为靶细胞,以CD19CAR-NK-92为效应细胞,流式细胞术检测细胞杀伤实验中存活肿瘤细胞的绝对数量并计算杀伤率.结果:成功构建慢病毒载体pLVX-CD19-CAR并包装病毒颗粒,感染NK-92细胞后CD 19CAR-NK-92细胞纯度高于90％;Western blotting分析显示CD19-CAR已经成功表达在NK-92中.CD19CAR-NK-92对ARH-77[(70.10±1.86)％ vs (1.95±0.63)％,P＜0.01]和HS-Sultan[(74.98±1.60)％ vs (0.58±1.49)％,P＜0.01]细胞的杀伤率显著高于空载体对照组ZsGreen-NK-92细胞,对U266的杀伤率无显著差别(P＞0.05).结论:成功构建了表达CD19CAR的NK-92细胞系,其对CD19阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞有特异性杀伤作用.

关键词：非霍奇金淋巴瘤、嵌合受体、CD19、NK-92、细胞毒性

所属期刊栏目：25

分类号：R730.5;R733.7(肿瘤学)

资助基金：浙江省重点科技创新团队资助项目2011R50018-06

在线出版日期：2018-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：767-771