稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株的建立

摘要：

目的:构建hsa-microRNA-224(miR-224)过表达慢病毒载体,建立稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株.方法:设计miR-224前体过表达基因片段,应用qRT-PCR法扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序比对分析.用GV369-miR-224慢病毒感染胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞,建立稳定过表达miR-224的MCC1细胞株.荧光显微镜下观察GV369-NC及GV369-miR-224慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCC1、GV369-miR-224-MCC1和GV369-NC-MCC1组细胞中miR-224的表达水平.结果:成功构建GV369-miR-224慢病毒表达载体质粒.GV369-miR-224-MCC1、GV369-NC-MCC1细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光.miR-224表达水平在GV369-miR-224-MCC1细胞中显著高于阴性对照GV369-NC-MCC1细胞和空白对照MCC1细胞(23.45±1.94 vs2.11±0.38,1.46±0.11,均P＜0.01),而两组对照组之间miR-224表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论:成功构建稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株,为探讨miR-224在胰腺黏液性囊腺癌中的功能及发病机制提供新的细胞模型.

关键词：miR-224、慢病毒载体、胰腺黏液性囊腺癌细胞株

所属期刊栏目：25

分类号：R735.9;R730(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81672892

在线出版日期：2018-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：721-725