2-脱氧葡萄糖增强顺铂对人黑色素瘤细胞杀伤作用及其机制

摘要：

目的:探讨2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-glucose,2-DG)和顺铂(cisplatin)药物组合对人黑色素瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:用MTT法检测细胞活力,Annexin-V/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡.Western blotting检测相关蛋白表达.细胞内ATP含量用生物发光试剂盒检测.结果:不同浓度顺铂(5～ 25 μmol/L)单药处理虽然能以剂量和时间依赖方式抑制A375细胞活力,但与2-DG(10 mmol/L)联合使用,顺铂处理浓度除5μmol/L外都显示增强对细胞活力的抑制作用.2-DG(10 mmol/L)单独处理并不诱导A375细胞出现明显死亡(＜10％),顺铂(20 μmol/L)单独作用导致50％左右的细胞死亡,而两者联合则导致大于80％的细胞死亡,与单独用药组比较差异显著(P＜0.01).顺铂单药或与2-DG联合均诱导Caspase-3和PARP-1裂解,并抑制抗凋亡蛋白Mcl-1的表达.2-DG联合顺铂(20 μmol/L)能明显抑制Ⅱ型己糖激酶表达,并且使细胞内ATP含量降低于对照组(6.3 vs 33.0 μmol/mg),与单药组比较差异显著(P＜0.01).2-DG联合顺铂不诱导正常人黑色素细胞凋亡.此外该药物联合对另外三种人黑色素瘤细胞(SK-100,C8161和Mum-2C)也有增强杀伤的作用.结论:2-DG能特异地增强顺铂诱导人黑色素瘤细胞凋亡的敏感性,作用机制可能与下调抗凋亡蛋白Mcl-1表达,抑制肿瘤己糖激酶水平和ATP合成有关.

关键词：黑色素瘤、2-脱氧葡萄糖、顺铂、细胞凋亡、三磷酸腺苷

所属期刊栏目：23

分类号：R730.53;R739.5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目No.81241148;大连市科技计划项目No.2014E14SF147.Project supported by the National Natural Science Foundation of China No.81241148,and the Science and Technology Plan of Dalian No.2014E14SF147

在线出版日期：2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：759-765