Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤生长的抑制作用

摘要：

目的:探讨重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤的抑制作用.方法:将Ad5-CCL20转染CT-26细胞,采用ELSA法和趋化实验分别检测CT-26细胞中CCL20的表达及其对DC的趋化作用.Western blot-ting检测热激结肠癌CT-26细胞中HSP70、GP96的表达.用热激后细胞蛋白(Heat组)对DC进行诱导,并设对照组(Control组)和阴性对照组(Unheat组),流式细胞术检测DC的表型.建立CT-26细胞移植瘤模型,设Ad5-CCL20/Heat、Heat、Ad5-CCIL20、Ad5-GFP和Control组,观察各组荷瘤小鼠肿瘤生长和生存时间;采用ELISAPOT法和LDH法分别检测脾组织T淋巴细胞分泌IFN-y的能力和对CT-26细胞的CTL杀伤活性,免疫组化法检测肿瘤组织DC浸润情况.结果:Ad5-CCL20转染CT-26细胞后可高表达CCL20,且对iDC、mDC都具有趋化活性,对iDC更为明显(P＜0.05).CT-26细胞热激后可高表达诱导型HSPT0和GP96.与Control、Unheat组相比,Heat组细胞蛋白诱导后DC的CD80、CD86、CCR6和MHC-Ⅱ的表达率明显升高(均P＜0.01).与Control、Ad5-GFP、Ad5-CCL20组和Heat组相比,联合治疗组荷瘤小鼠的肿瘤抑制最为明显(均P＜0.01),生存时间明显延长(均P ＜0.05).联合治疗后的荷瘤小鼠脾组织T淋巴细胞的CTL活性要明显高于另外四组(均P＜0.05),其瘤组织中CD11c+ DC的阳性率也明显增高(均P＜0.05).结论:重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗可召募并促进DC成熟和抗原提呈,明显抑制肿瘤生长,并延长荷瘤小鼠的生存期,提示其对结肠癌有潜在的治疗作用.

关键词：趋化因子、CCL20、腺病毒、树突状细胞、热疗、结肠癌

所属期刊栏目：23

分类号：R735.3+5;R730.58(肿瘤学)

资助基金：上海市科委医学引导项目资助No.124119a3602.Project supported by the Medical Guide Program of Science and Technology Committee of Shanghai No.124119a3602

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：633-639