热激胃癌细胞外泌体致敏DC诱导显著的抗肿瘤免疫反应

摘要：

目的:探讨热激胃癌细胞来源外泌体致敏树突状细胞(dendritic cells,DCs)诱导的肿瘤特异性细胞毒T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)反应.方法:制备小鼠前胃癌细胞(murine foregastric cancer cells,MFC)来源外泌体(Exo)、热激MFC细胞来源外泌体(Exo/HS)及MFC细胞冻融抗原(lysates,Lys),通过电镜观察外泌体的形态,Western blotting检测外泌体的成分.培养小鼠骨髓来源的DCs,将Exo/HS、Exo和Lys冲击致敏DCs,制备的DCs瘤苗分别命名为DC-Exo/HS、DC-Exo和DC-Lys.HSP70小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)转染MFC细胞,热激后分离上清,用制备外泌体致敏DCs,流式术检测DCs的表型.以DC-Exo/HS、DC-Exo、DC-Lys、DC和PBS免疫小鼠,3H-TdR法检测脾脏T细胞的增殖,LDH法检测脾细胞CTL活性.建立MFC细胞荷瘤小鼠模型,观察各组DCs瘤苗的免疫治疗效应.结果:电镜确认外泌体为膜性小囊泡.Western blotting检测表明,Exo/HS含有高水平的HSP70,流式术发现热激MFC细胞来源外泌体能显著上调DCs表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86和CD40分子的表达,HSP70 siRNA干扰能下调热激MFC细胞来源外泌体刺激的DCs表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86和CD40分子的表达.3H-TdR检测结果显示DC-Exo/HS刺激T细胞增殖的能力显著强于DC-Exo、DC-Lys、DC和PBS组(均P＜0.01),LDH检测结果表明DC-Exo/HS诱导的CTL活性显著高于DC-Exo、DC-Lys、DC和PBS组(均P＜0.01),HSP70 siRNA组诱导的CTL活性显著低于对照siRNA组(P＜0.01).免疫治疗结果显示,DC-Exo/HS对荷瘤小鼠的肿瘤抑制效应显著优于其他各组(P＜0.01).结论:热激胃癌细胞来源外泌体致敏的DCs能诱导显著的抗肿瘤免疫反应.

关键词：热激、胃癌细胞、外泌体、树突状细胞、抗肿瘤免疫

所属期刊栏目：23

分类号：R730.51;R392.12(肿瘤学)

资助基金：浙江省自然科学基金资助项目No.LY14HY160011.Project supported by the Natural Science Foundation of Zhejiang Province No.LY14HY160011

在线出版日期：2016-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：188-194