目的:探讨舒尼替尼促进肝癌细胞自然杀伤细胞2族成员D配体(natural killer group 2 member D ligands,NKG2DLs)表达及提高NK细胞杀伤肿瘤细胞的作用.方法:常规体外培养HepG2细胞,免疫磁珠法从健康志愿者外周静脉血中分选NK细胞,流式细胞技术检测NK细胞纯度及1μmol/L舒尼替尼孵育24h前后肝癌细胞NKG2DLs表达率;LDH释放测定法检测NK细胞对药物处理前后靶细胞的杀伤活性,实时荧光定量PCR检测药物处理前后HepG2细胞NKG2DLsmRNA的表达情况.结果:分选后NK细胞(CD3-CD16+ CD56+细胞)的纯度达78%以上;经舒尼替尼处理后靶细胞MHC-Ⅰ类链相关分子A或B(MHC class Ⅰ-related chain molecules A/B,MICA/MICB)、人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白(UL16-binding proteins,ULBPs)的表达率均有升高,以MICA、MICB和ULBP2升高最明显(F=17.73,P=0.000).当效靶比为10∶1、20:1时,NK细胞对舒尼替尼处理前后HepG2细胞的杀伤活性分别从(9.47±1.11)%、(20.45±1.94)%上升到(28.88±1.23)%、(44.93 ±1.57)%,舒尼替尼处理前后NK细胞对靶细胞杀伤活性的差异有明显统计学意义(P<0.05).舒尼替尼处理HepG2细胞后,MICA、MICB和ULBP2mRNA表达水平明显升高(F =62.628,P =0.000).结论:舒尼替尼能选择性诱导肿瘤细胞高表达NKG2DLs(MICA/B和ULBP2),并增强NK细胞杀伤活性.
舒尼替尼、肝癌细胞、自然杀伤细胞、自然杀伤细胞2族成员D、杀伤活性
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R735.7;R730.54(肿瘤学)
国家自然科学青年基金资助项目No.81302372,81300431;南方医科大学珠江医院优秀中青年人才项目资助No.201207008 .Project supported by the National Natural Science Foundation for Young Scientists of China No.81302372,81300431,and the Excellent Middle and Yong Aged Experts Project of Zhujiang Hospital Southern Medical UniversityNo.2012007008