不同方式负载AFP抗原的DC诱导抗肝癌HepG2细胞免疫效应的比较

摘要：

目的:比较AFP抗原以不同方式负载DCs对后者生物学功能的影响及体外刺激CTL对肝癌HepG2细胞的杀伤作用.方法:分离健康供者外周血单个核细胞培养DC,分别用(A)人工合成AFP抗原肽、(B)HepG2细胞裂解物、(C)HepG2细胞分泌的外泌体(tumor exosome,T-exo)、(D)AFP抗原的重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus express-ingα-fetoprotein antigen,rAAV/AFP)致敏DC前体细胞及(E)未负载抗原的DC作为对照,经GM-CSF、IL-4及LPS联合诱导DCs分化成熟.流式细胞术检测rAAV/AFP病毒感染效率、各组DCs表型及其刺激初始T细胞的增殖效应,7-ADD/CFSE双染法流式细胞术检测各组DCs诱导CTL对AFP阳性HepG2细胞的杀伤作用.结果:几种抗原负载方式均可诱导DCs成熟、促进CTL增殖及特异性识别并杀伤HepG2细胞,但rAAV/AFP感染DCs后,其CD83、CD86、ICAM-1、CD58、CD40分子表达水平明显高于对照组(P＜0.05),rAAV/AFP+ DC组和HepG2-Texo+ DC组对HepG2细胞的杀伤作用均分别显著优于其他抗原负载(AFP/peptide+ DC、HepG2 lysate+ DC)组[(44.92±4.12)％vs(28.42±3.29)％、(24.28±1.79)％;(41.40±2.87)％ vs(28.42±3.29)％、(24.28±1.79)％;均P＜0.05)].结论:rAAV/AFP高效感染DCs后能有效刺激初始T细胞增殖,并增强CTL对AFP阳性靶细胞的杀伤活性,而负载Texo的DCs也能诱导显著的抗肝癌效应,上述结果为基于DCs的肝癌疫苗的研发提供新的思路.

关键词：树突状细胞、肝癌、细胞毒T细胞、腺相关病毒、外泌体

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分类号：R735.7;R730.51(肿瘤学)

资助基金：国家卫生和计划生育委员会科研基金——福建省卫生教育联合攻关计划资助项目No.WKJ-FJ-04;厦门大学药学院-福建省肿瘤医院促进科技合作联合研究基金资助项目No.2014LY-2L-04.Project supported by the National Health and Family Planning Commission Science Research Foundation-Health Education Joint Research Program of Fujian ProvinceNo.WKJ-FJ-04,and the Joint Research Foundation of Promoting Science and Technology Cooperation between School of Phamaceutical Sciences of Xiamen University and Fujian Provincial Cancer HospitalNo.2014LY-2L-04

在线出版日期：2015-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：590-596