10.3872/j.issn.1007-385X.2014.05.010
K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果.方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果.结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65 ±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%.对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右.结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要.
自然杀伤细胞、细胞毒活性、抗体依赖性细胞介导的细胞毒活性、体外扩增、活化性受体、抑制性受体
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R730.3;R730.54(肿瘤学)
陕西省自然科学基金资助项目No.2014JM4171.Project supported by the National Natural Science Foundation of Shaanxi Province No.2014JM4171
2014-11-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
537-542