miRNA-486-5p对胃癌细胞SGC7901中NRP2表达的影响

摘要：

目的:预测并鉴定miRNA-486-5p在人胃癌细胞SGC7901中的靶基因及其表达.方法:采用生物信息学技术预测miRNA-486-5p的作用靶点,构建miRNA-486-5p过表达质粒(GV214-miR)并转染入SGC7901细胞(SGC7901-miR)中,以空质粒转染SGC7901细胞(SGC7901-miR-NC)为阴性对照,以SGC7901细胞为空白对照.Real-time PCR检测转染细胞中miRNA-486-5p及其靶基因神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2) mRNA的表达,Western blotting检测NRP2的表达,双荧光素酶实验验证miRNA-486-5p对NRP2基因的调控机制.结果:经生物信息学预测,选择与胃癌生物学行为密切相关的NRP2作为miRNA-486-5p的靶基因.与空白组相比,GV214-miR转染后的SGC7901细胞miRNA-486-5p表达显著上调[(8.21±1.18)vs(1.02 +0.26),P＜0.01],NRP2 mRNA表达无明显变化(P＞0.05),而NRP2蛋白表达则明显下调[(0.36±0.06) vs(0.76 ±0.05),P＜0.05],双荧光素酶实验证实miRNA-486-5p可与NRP2 mRNA 3'-UTR直接结合,从而发挥对NRP2转录后翻译的抑制作用.结论:miRNA-486-5p在胃癌细胞SGC7901中可直接作用于NRP2 mRNA 3'UTR,从而抑制其表达.

关键词：miRNA-486-5p、胃癌、生物信息学技术、神经纤毛蛋白2、转染

所属期刊栏目：21

分类号：R735.2;R730.54;R730.2(肿瘤学)

在线出版日期：2014-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：298-302