hCaMKⅡNα对结肠肿瘤分泌免疫抑制因子的抑制作用

摘要：

目的:探讨钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白α(human calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ inhibitory alpha,hCaMKⅡNα)对结肠肿瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响及其作用机制.方法:将hCaMKⅡNα基因表达载体(pKⅡNα)或siRNA(si-KⅡNα)转染至结肠肿瘤细胞(LoVo细胞、SW620细胞和HT29细胞),形成过表达或干扰表达细胞.RT-PCR检测结肠癌LoVo细胞过表达hCaMKⅡα后白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)mRNA表达水平,ELISA法检测转染pKⅡNα或si-KⅡNα对SW620和LoVo细胞中VEGF、PGE2、IL-8和IL-10分泌的影响.为观测细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)在hCaMKⅡNα介导的细胞因子调控中的作用,利用U0126抑制HT-29细胞中ERK1/2活性后,检测hCaMKⅡNα表达下调对VEGF和IL-8分泌的影响.结果:hCaMKⅡ可显著抑制结肠癌LoVo细胞中VEGF、IL-8和IL-10mRNA水平的表达;可抑制SW620和LoVo细胞中IL-8和VEGF蛋白的分泌,但对PGE2和IL-10的分泌没有影响.相应地,利用RNA干扰技术下调hCaMKⅡNα表达可显著上调HT29细胞中IL-8和VEGF的分泌;并且发现MEK1/2活性的抑制可完全阻断hCaMKⅡNα对IL-8的影响,但只能部分阻断对VEGF的影响.结论:hCaMKⅡNα通过抑制ERK活性下调结肠肿瘤细胞VEGF和IL-8的分泌,在结肠肿瘤免疫逃逸中起到负相调控作用.

关键词：钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白、结肠肿瘤、LoVo细胞、SW620细胞、HT29细胞、VEGF、IL-8、IL-10

所属期刊栏目：21

分类号：R735.3+5;R730.54(肿瘤学)

在线出版日期：2014-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：263-268