表皮生长因子受体通路底物8疫苗对乳腺癌细胞的抑制效应及其可能机制

摘要：

目的:探索表皮生长因子受体通路底物8(epidermal growth factor receptor substrate 8,EPS8)疫苗对乳腺癌细胞的抑制效应及其可能的机制.方法:Western blotting检测EPS8蛋白在小鼠乳腺癌4T1细胞株中的表达.通过基因重组、表达和纯化等技术制备特异性的小鼠源性EPS8,以EPS8蛋白为靶点制备抗肿瘤疫苗并免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定免疫前后不同时间小鼠血清内抗EPS8抗体效价;流式细胞术检测免疫前后的脾T淋巴细胞亚群比例.建立乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠模型并接种EPS8疫苗,接种佐剂作为对照,比较2组荷瘤小鼠的生存期、肿瘤体积、肿瘤重量,计算EPS8疫苗抑瘤率;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾T淋巴细胞亚群比例,LDH法检测其细胞毒性T细胞(CTL)杀伤率.结果:EPS8蛋白在乳腺癌4T1细胞株中高表达.成功构建的EPS8蛋白疫苗免疫小鼠后产生抗EPS8抗体,且随着免疫次数的增加,小鼠体内抗EPS8抗体滴度呈上升趋势.乳腺癌4T1细胞接种于经EPS8疫苗或佐剂免疫后的小鼠后,与佐剂对照组相比,EPS8疫苗组小鼠生存期显著升高[中位生存时间:44(38～50) vs 37 (34～40)d;t=2.477,P=0.043],肿瘤质量显著降低[(2.21±0.35)vs(3.31±0.88)g;t=3.574,P=0.009],EPS8疫苗的抑瘤率为33.23％.EPS8疫苗组小鼠脾CD4+T比例和CD4 +/CD8+比值均显著高于佐剂对照组(P＜0.001),EPS8疫苗组CD4+ CD25+ Treg/CD4+T细胞的比值显著低于佐剂对照组(P＜0.001).效靶比为20:1时,EPS8疫苗组CTL对靶细胞的杀伤活性即显著高于佐剂对照组[(19.05±4.41)％ vs (13.36±3.10)％;t=2.263,P=0.040].结论:EPS8疫苗不仅具有诱导小鼠产生体液免疫应答的功能,还能够降低荷瘤小鼠体内Treg细胞比例,激活机体内T细胞免疫功能;EPS8疫苗可抑制肿瘤的生长、有效延长荷瘤小鼠的生存期.

关键词：肿瘤疫苗、表皮生长因子受体通路底物8、乳腺癌、4T1细胞

所属期刊栏目：21

分类号：R737.9;R730.51(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81372249;教育部高校博士点基金20114433110012;广东省教育厅科技创新项目2012KJCX0025;the National Natural Science Foundation of China81372249;the University Doctoral Foundation of Education Ministry20114433110012;the Science and Technology Innovation Project of the Education Bureau of Guangdong Province2012KJCX0025

在线出版日期：2014-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：55-61