TLR4信号通过对miR-21的表达调控影响乳腺癌4T1细胞的凋亡和增殖

摘要：

目的:探讨TLR4信号对乳腺癌4T1细胞株中miR-21表达的影响及调控机制,研究miR-21对乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响.方法:体外培养乳腺癌细胞株4T1,以TLR4配体LPS刺激6、12、18、24 h,实时荧光定量PCR检测4T1细胞中miR-21的表达变化.Western blotting检测TLR4信号活化后4T1细胞中NF-κBp65的表达和磷酸化情况;应用NF-κB抑制剂PDTC预处理30 min,实时荧光定量PCR检测4T1细胞中miR-21的变化.转染miR-21抑制剂和阴性对照后,Annexin-V/PI双标法检测4T1细胞凋亡情况,MTT法检测4T1细胞增殖情况.结果:LPS刺激致TLR4信号活化能够时间依赖性地上调miR-21的表达(18 h时:2.07 ±0.33 vs1;t=5.61,P=0.03),TLR4信号能够时间依赖性地上调NF-κB的活化,NF-κB抑制剂PDTC能明显抑制TLR4信号诱导的4T1细胞的miR-21上调(0.70±0.10 vs 2.14 ±0.32;t=-7.357,P=0.002).与阴性对照组相比,miR-21抑制剂组4T1细胞的凋亡率明显增高[(24.2±2.4)％ vs (14.8±5.1)％;t=2.891,P=0.044],4T1细胞的增殖能力明显降低(0.42 ±0.02 vs0.55 ±0.01;t=-8.528,P=0.001).结论:TLR4信号通路的活化能够上调乳腺癌4T1细胞中miR-21的表达,其机制与NF-κB的活化有关;靶向抑制miR-21能有效促进4T1细胞的凋亡、抑制4T1细胞增殖.

关键词：乳腺癌、4T1细胞、miR-21、TLR4信号、凋亡、增殖

所属期刊栏目：21

分类号：R730.2;R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81172515;the National Natural Science Foundation of China81172515

在线出版日期：2014-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：14-19