131I标记CD133单链抗体对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用

摘要：

目的:研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment,ScFv)在体外对人肝癌CD133+ HepG2干细胞的抑制作用.方法:免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133+ HepG2细胞的“干性”.氯胺T法131I标记CD133 ScFv并测定标记率、比活度、放射性浓度.将分选出的CD133+ HepG2细胞分为131I-CD133抗体治疗组、131I治疗组、CD133抗体治疗组和131I+CD133抗体治疗组,MTT法检测各组中对CD133+ HepG2细胞生长抑制的最适剂量和不同药物在12、48、72 h三个时间点对CD133+ HepG2干细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测各组细胞周期的变化.结果:分选的HepG2细胞的CD133表达率显著高于未分选细胞[(97.71±1.13)％ vs(1.52±0.78)％,t=1.13、P=0.000].CD133+ HepG2细胞相对于CD133-HepG2细胞具有更强的体外成球、克隆形成能力[(45.03±1.35)％ vs (7.4±0.54)％;t=3.92,P=0.000]和体内成瘤能力.131I-CD133 SeFv的标记率为88.92％,放射化学纯度为98.63％.当131I为3.7 MBq/100μl、CD133抗体为1μg/100μl时,对CD133+ HepG2细胞的抑制率最高,达(89.58±0.74)％;在此剂量下131I-CD133 ScFv治疗组对CD133+ HepG2细胞生长抑制率显著高于其余各实验组,且呈时间依赖性.131 I-CD133 ScFv治疗组G0/G1期细胞比例为(27.50±1.12)％,较其余各组均明显减少(P＜0.05).结论:成功制备的131I-CD133 SeFv在体外能有效抑制人肝癌CD133+ HepG2干细胞的生长.

关键词：肝癌干细胞、CD133、131I、单克隆抗体、单链抗体

所属期刊栏目：21

分类号：R735.1;R730.51(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30370422,81171365;the National Natural Science Foundation of China30370422,81171365

在线出版日期：2014-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：7-13