慢病毒介导EGFL7沉默对肺癌A549细胞体外生物学行为的影响

摘要：

目的:通过慢病毒介导沉默表皮生长因子样结构域7基因(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)在肺癌A549细胞的表达,探讨EGFL7对A549细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成的影响.方法:利用慢病毒介导靶向EGFL7的shRNA(LV-RNAi)转染A549细胞,实验分三组:LV-RNAi组(转染LV-RNAi),LV-NC组(转染空病毒)和对照组(A549细胞).Real-time PCR和Western blotting分别检测LV-RNAi感染对A549细胞EGFL7 mRNA和蛋白水平表达的影响,MTT法和流式细胞术分别检测沉默EGFL7对A549细胞增殖和凋亡的影响,Transwell侵袭实验和鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)实验分别检测沉默EGFL7对A549细胞侵袭和血管生成能力的影响.结果:慢病毒稳定高效地转染A549细胞,LV-RNAi组细胞内EGFL7 mRNA[(0.18 ±0.03)vs(0.98 ±0.05)、(1.03±0.09),P＜0.05]和蛋白表达较LV-NC组和对照组显著降低.与LV-NC组及对照组相比,沉默EGFL7对LV-RNAi组A549细胞的增殖活力[感染120 h时:(0.73±0.22) vs (0.79±0.08)vs(0.81±0.11),P＞0.05]与和凋亡率[感染120 h时:(1.92％±0.06)vs(2.11％±0.07)vs (1.85％±0.13),P＞0.05]均无显著影响;同时,LV-RNAi组A549细胞侵袭入下室细胞数[(61.7±14.5) vs (272.8±21.5)、(286.6±40.0)/mm2,P＜0.05]与血管生成指数[(31.7±4.1)vs(96.3±4.4)、(103.3±6.5),P＜0.05]均显著减少.结论:沉默EGFL基因能够抑制A549细胞侵袭和血管生成能力,但不影响其增殖与凋亡.

关键词：EGFL7、肺癌、血管生成、侵袭、RNA干扰

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分类号：R737.2;R730.54(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目资助30972718;江苏省自然科学基金资助项目BK2012606;江苏省研究生创新工程资助项目CXZZ12_0837;江苏省属高校自然科学研究面上项目资助No.13KJB320019.Project supported by the National Natural Science Foundation of China30972718;the Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceBK2012606;the Post-graduate Culture and Innovation Foundation of Jiangsu ProvinceCXZZ12 _0837;the Natural Science Foundation of Colleges and Universities in Jiangsu Province13KJB320019

在线出版日期：2014-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：667-672