表达FLT1-CAR的Jurkat细胞的筛选及其对VEGF的趋向性

摘要：

目的:通过慢病毒介导获得表达针对血管内皮细胞生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1/FLT1)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)的Jurkat细胞,探讨其对VEGF的趋向性.方法:合成针对VEGFR1的CAR(FLTl-CAR),构建重组慢病毒载体LV-gn-FLTl-CAR,并感染Jurkat细胞；经G418筛选得到稳定转染细胞株；PCR及流式细胞术检测细胞株中FLT1-CAR mRNA及蛋白的表达,Transwell法检测细胞株对VEGF的趋化效果.结果:重组慢病毒LV-gn-FLT1-CAR成功构建；FLT1-CAR成功整合到Jurkat细胞中并稳定表达FLT1-CAR蛋白.筛选的细胞株Jurkatgn-FLT1-CAR-1、Jurkat-gn-FLT1-CAR-2对VEGF有显著趋化效果,100 ng/m1 VEGF处理后,Jurkat-gn-FLT1-CAR-1细胞趋化数为(62±8)个,显著高于对照组Jurkat趋化细胞数的(18±5)个(P＜0.01).结论:成功筛选到稳定表达FLT1-CAR的Jurkat细胞克隆,其对VEGF有明显的趋向作用.

关键词：血管内皮细胞生长因子、CXC趋化因子受体3、嵌合抗原受体、Jurkat细胞、趋化作用

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分类号：R730.51;R392.1(肿瘤学)

资助基金：国家科技部重大专项基金资助项目2012ZX0002014-005;国家自然科学基金面上项目No.81071850.Project supported by the Major Special Foundation from Ministry of Science and Technology of China2012ZX0002014-005;the Genearl Program of the National Natural Science Foundation of China810850

在线出版日期：2013-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：559-564