10.3872/j.issn.1007-385X.2013.02.014
KLK7 siRNA对胃癌AGS细胞的抑制作用
目的:体外合成4条靶向人组织激肽释放酶7(kallikrein-related peptidase 7,KLK7)基因的片段,并筛选最有效siRNA片段,观察沉默KLK7表达对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计4条靶向KLK7的siRNA片段(KLK7-siRNA-416、KLK7-siRNA-596、KLK7-siRNA-474、KLK7-siRNA-795),瞬时转染AGS细胞,qRT-PCR检测各干扰组KLK7 mRNA表达的变化,Western blotting检测AGS细胞中HK7蛋白(由KLK7基因编码)的表达,MTT法检测转染后AGS细胞的增殖,流式细胞术检测AGS细胞的细胞周期及凋亡.结果:4条KLK7-siRNA片段中以KLK7-siRNA-416的干扰效率最高,KLK7-siRNA-416组KLK7 mRNA表达率显著低于NC组[(0.32±0.049)%vs(0.93 ±0.071)%,P<0.01],KLK7-siRNA-416组转染48 h后AGS细胞HK7蛋白的表达水平显著降低[(1.18 ±0.198) vs(0.52±0.096),P<0.01].KLK7-siRNA-416转染72 h后对AGS细胞增殖的抑制率达(37.70±0.12)%(P<0.05),该转染阻滞AGS细胞于G0/G1期但不影响AGS细胞的凋亡.结论:KLK7-siRNA沉默KLK7的表达可抑制AGS细胞的增殖,可阻滞细胞于G0/G1期,对细胞凋亡的作用不明显.
胃癌、RNA干扰、KLK7、AGS细胞、增殖、细胞周期
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R735.2;R730.54(肿瘤学)
2013-08-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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