Lenti-TK介导间充质干细胞对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用

摘要：

目的:观察慢病毒-胸苷激酶(lentivirus-thymidine kinase,Lenti-TK)/间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用.方法:构建包含TK基因的重组慢病毒表达载体Lenti-TK,感染MSC后得到Lenti-TK-MSC,RT-PCR及Western blotting检测Lenti-TK-MSC中HA-TK的表达.免疫磁珠法从鼻咽癌5-8F细胞中分选CD133+细胞；Transwell小室迁移实验检测Lenti-TK-MSC对CD133+ 5-8F细胞的趋向性；Lenti-TK-MSC联合更昔洛韦(ganciclovir,Lenti-TK-MSC/GCV)与CD133+5-8F细胞共培养,CCK-8试剂盒检测其对细胞的杀伤作用和旁观者效应.结果:成功构建重组慢病毒载体Lenti-TK,其滴度为1×108UT/ml,Lenti-TK(MOI=50)感染MSC 72 h时,感染效率达(95.1±0.1)％.Lenti-TK-MSC迁移至CD133+ 5-8F细胞组的细胞数明显多于CD133-5-8F细胞组、未分选5-8F细胞组[(83.0±8.7)vs(29.6±5.3)、(38.3±5.2),P=0.000].Lenti-TK-MSC/GCV处理组与单独GCV处理组、Lenti-TK-MSC/GCV条件培养液(即Lenti-TK-MSC加入1 mg/L GCV培养48 h的培养上清)处理组相比,CD133+ 5-8F细胞的存活率明显降低[(37.2±2.3)％vs(98.5±3.1)％、(83.8±3.4)％,P=0.000].Lenti-TK-MSC数量达到混合细胞总数(Lenti-TK-MSC和CD133+ 5-8F细胞)的20％时,CD133+ 5-8F细胞存活率为(68.2±2.3)％,表现出明显的旁观者杀伤效应.结论:Lenti-TK感染后MSC对鼻咽癌CD133 + 5-8F细胞具有靶向迁移及杀伤作用.

关键词：鼻咽癌、CD133+细胞、间充质干细胞、肿瘤干细胞、肿瘤靶向基因治疗、旁观者效应

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分类号：R739.63;R730.54(肿瘤学)

资助基金：广东省科技计划资助项目2010B031200009

在线出版日期：2013-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：145-152