siRNA沉默CCL18的表达抑制卵巢上皮癌SKOV3细胞的侵袭和迁移

摘要：

目的:探讨体外沉默CCL18基因的表达对卵巢上皮癌SKOV3细胞侵袭和迁移的影响.方法:化学合成3对靶向CCL18的siRNA(CCL18-siRNA61、CCL18-siRNA127、CCL18-siRNA224),体外转染至CCL18阳性的SKOV3细胞,RT-PCR检测SKOV3细胞中CCL18 mRNA的表达,选取其中干扰效率最好的序列,构建靶向CCL18的干扰质粒pSilencer4.1-CCL18-siRNA61.pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染SKOV3细胞后,MTT法测定SKOV3细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的细胞周期,采用Transwell法、Migration法以及Fibronectin黏附法分别测定细胞的体外侵袭、迁移、黏附能力.结果:3对靶向CCL18的siRNA中CCL18-siRNA61干扰效果最好,进而成功构建靶向CCL18的pSilencer4.1-CCL18-siRNA61干扰质粒,pSi-lencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染可显著下调SKOV3细胞中CCL18 mRNA的表达.pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染不影响SKOV3细胞的增殖,但pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染组SKOV3细胞中(S+G2+M)期细胞比例明显低于对照质粒pSilencer4.1-Ctrl-siRNA转染组[(19.71±4.4)％ vs (26.45±7.91)％,P＜0.05]；且与pSilencer4.1-Ctrl-siRNA质粒转染相比,pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染可有效抑制SKOV3细胞的侵袭、迁移和黏附能力[(9.91±3.41)％vs(23.75±6.81)％,(16.80±8.71)％vs(31.74±11.23)％,(6.73 ±4.33)％vs(17.53±6.54)％；均P＜0.05].结论:siRNA沉默CCL18的表达可抑制卵巢上皮癌细胞株SKOV3的侵袭、迁移和黏附能力.

关键词：卵巢上皮癌、SKOV3细胞、CCL18基因、siRNA、侵袭、迁移、黏附

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分类号：R737.31;R730.54(肿瘤学)

资助基金：广西科技厅重点研究项目资助2010GXNSFD013053;广西科技厅攻关研究项目资助1140003A-34

在线出版日期：2013-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：30-36