人喉癌5-氟尿嘧啶耐药细胞株的建立及其生物学特性

摘要：

目的:建立人喉癌5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5 -FU)耐药细胞系,为喉癌的耐药机制研究提供模型.方法:以高剂量浓度递增间歇给药的方法诱导筛选人喉癌Hep-2的多药耐药细胞株Hep-2/5-FU,比较两组细胞的形态和倍增时间；MTT法确定细胞的IC50及其耐药指数；流式细胞仪检测两组细胞的细胞周期分布以及细胞内的罗丹明聚集；实时定量PCR法检测MDR1 mRNA的表达,Western blotting检测相应MDR1-P蛋白的表达.结果:建成性能稳定的Hep-2/5 -FU耐药细胞株,并与顺铂及长春新碱有不同程度的交叉耐药性,且Hep-2/5 -FU细胞倍增时间较Hep-2细胞延长[(31.25±4.37)h vs (25.62±3.53)h,P＜0.05].Hep-2/5-FU细胞G0／G1期比例升高[(45.6±3.4)％ vs(30.5±1.2)％,P＜0.05],而S期比例明显降低[(3Z.1±4.2)％vs(52.4±3.6)％,P ＜0.05]:Hep-2细胞内的罗丹明较Hep-2/5 -FU细胞明显升高[(89.83±0.52)％vs (14.38±0.48)％,p＜0.01]；Hep-2/5-FU细胞MDR1 mRNA[(13.69±1.12)vs(17.82±0.61),P＜0.05]及其编码的MDR1-P蛋白水平高于Hep-2细胞.结论:Hep-2/5-FU细胞株具有明确及稳定的多药耐药性,为喉癌的耐药机制提供了研究的模型.

关键词：喉肿瘤、5-FU:耐药细胞株

所属期刊栏目：19

分类号：R739.65;Q279(肿瘤学)

资助基金：上海仁济医院科研培育基金项目RJPY10-011

在线出版日期：2012-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：201-205