共表达ENDO-VEGI151和survivin-siRNA双功能质粒的构建及其抗瘤活性

摘要：

目的:构建pCDNA3.1-ENDO-VEGI151/survivin-shRNA (pEV/si-survivin)双功能表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUEVC)增殖和凋亡的影响,探讨其治疗肿瘤的可行性.方法:利用MDA-MB-231细胞筛选获得survivin的高效siRNA序列,构建pEV/si-survivin表达质粒并分别转染MDAMB-231和HUEVC,以real-time PCR和Western blotting检测转染细胞中ENDO-VEGI151和survivin的表达；MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡.结果:成功构建pEV/si-survivin双功能表达质粒,并能在MDA-MB-231和HUEVC中正确表达相应基因产物.该质粒可明显抑制MDA-MB-231细胞内survivin的表达,并抑制细胞增殖[48、72 h的抑制率为(39.36±4.16)％、(48.43±3.49)％],促进MDA-MB-231细胞凋亡[(18.33±1.48)％ vs (4.80±1.0l)％,P＜0.01)和细胞周期阻滞(P＜0.05)；该质粒也明显抑制HUEVC的增殖[(48、72 h的抑制率为(38.16±3.37)％、(53.75±4.53)％),并促进HUEVC凋亡和细胞周期阻滞(P＜0.05).结论:成功构建的pEV/si-survivin双功能表达质粒可以同时发挥抑制新生血管生成和促肿瘤细胞凋亡的作用,提高抗肿瘤的效果.

关键词：乳腺癌、survivin、抗血管生成、凋亡、基因治疗

所属期刊栏目：18

分类号：R737.9;R730.54(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金51003078;上海市卫生局科研课题2008133

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：394-399