乳腺癌特异性多肽介导的HSV-TK/GCV系统的构建及其靶向杀伤效应

摘要：

目的:研究乳腺癌MDA-MB-231细胞特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用.方法:以PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI -TK,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-PI-TK载体,转化宿主菌,经IPTG诱导表达PI-TK融合蛋白,利用His-Tag对其进行纯化,SDS-PAGE和Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白.将不同质量浓度的PI-TK融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,联合更昔洛韦(ganciclovier,GCV)作用后,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,CCK-8法检测MDA-MB-231细胞的增殖.结果:成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)-PI-TK,获得纯化的PI -TK融合蛋白,SDS-PAGE及Western blotting鉴定PI -TK融合蛋白表达正确.单独PI -TK融合蛋白不影响MDA-MB-231细胞的形态和增殖,但PI -TK融合蛋白联合GCV能剂量依赖性靶向抑制MDAMB-231细胞的增殖,200 μg/ml PI-TK+ 10 mg/L GCV作用的抑制率达(68.9±7.57)％；PI-TK联合GCV抑制MDA-MB-231细胞的IC50值为152.64 μg/ml.上述各作用对MDA-MB-435细胞均无影响(P＜0.05).结论:乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统可靶向杀伤MDA-MB-231细胞.

关键词：乳腺癌特异性多肽、PI、乳腺癌、MDA-MB-231细胞、HSV-TK/GCV抗瘤系统、靶向性

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分类号：R737.9;R730.5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金3086033;云南省应用基础研究重点项目资助2009CC023:;云南省科技基础条件平台建设项目资助2007DA006

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：383-388