5/35嵌合型溶瘤腺病毒SG635对肝癌细胞的抑制作用

摘要：

目的:研究5/35嵌合型溶瘤腺病毒SG635在体外对肝癌HepG2和SMMC-7721细胞的特异性杀伤作用.方法:将SG600载体中5型腺病毒(Ad5)纤毛蛋白的knob和shaft结构域替换为35型腺病毒(Ad35)纤毛蛋白的相应结构域,构建成5/35嵌合型溶瘤腺病毒SG635.流式细胞术检测5/35嵌合型腺病毒Ad5/35-EGFP对HepG2和SMMC-7721细胞的感染效率,体外病毒增殖实验观察溶瘤腺病毒SG635的增殖能力,Western blotting检测SG635感染后肝癌细胞中E1A蛋白的表达,CCK-8实验检测SG635对肝癌HepG2和SMMC-7721细胞的杀伤作用.结果:在肝癌HepG2和SMMC-7721细胞中,Ad5/35-EGFP的感染效率明显强于5型腺病毒Ad5 -EGFP; 5/35嵌合型溶瘤腺病毒SG635在HepG2和SMMC-7721细胞中72 h的增殖倍数高于5型溶瘤腺病毒SG600(15848.93 vs 6309.57,6309.57 vs 5011.87,均P＜0.01),而在人正常成纤维细胞BJ中几乎不增殖.SG635感染后,HepG2和SMMC-7721细胞中E1A蛋白表达高于SG600感染,在BJ中则无E1A表达.在一定MOI范围内,SG635对于HepG2细胞和SMMC-7721细胞的杀伤作用逐渐增强,且杀伤率明显强于SG600(MOI为1时,90％ vs 60％；MOI为10时,90％ vs 50％),对BJ 无杀伤作用.结论:5/35嵌合型溶瘤腺病毒SG635能够高效感染并特异性杀伤肝癌细胞,具有较好的靶向性和安全性.

关键词：溶瘤腺病毒、肝癌、病毒治疗、E1A蛋白

所属期刊栏目：18

分类号：R730.5;R735.7(肿瘤学)

资助基金：“十一五”国家科技重大专项课题资助项目2008ZX10002-025;2008ZX10002-026;国家重点基础研究发展计划973计划资助项目2009CB522404;教育部新世纪优秀人才基金NCET-08-0583;全国优秀博士论文专项基金FANEDD 200774

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：373-377