KLF4对肿瘤干细胞自我更新和增殖潜能的影响

摘要：

目的:分析Krüppel样因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)对肿瘤干细胞T3A-A3自我更新和增殖能力的影响.方法:构建靶向干扰KLF4的慢病毒载体pLVTHM-shKLF4,利用前期实验分离与鉴定的肿瘤干细胞T3A-A3,应用RT-PCR和Western blotting分别检测pLVTHM-shKLF4感染后T3A-A3细胞中KLF4 mRNA和蛋白的表达.细胞球形成实验检测pLVTHM-shKLF4感染对T3A-A3细胞自我更新的影响,平板集落形成实验检测T3A-A3细胞的克隆形成能力,流式细胞术检测T3A-A3细胞周期变化.裸鼠皮下移植瘤实验观察pLVTHM -shKLF4干扰KLF4表达后对T3A-A3细胞移植瘤生长的影响.结果:与肝癌细胞BEL-7402、HepG2相比,肿瘤干细胞T3A-A3表达更高水平的KLF4；pLVTHM-shKLF4感染能够在mRNA和蛋白水平下调T3A-A3细胞中KLF4的表达.pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞形成细胞球的直径明显小于对照病毒的pLVTHM-shNC感染的T3A-A3细胞[(104.33±16.28) vs (186.67±28.15) μm,P＜0.01],pLVTHM-shKLF4感染细胞形成的细胞克隆数日明显少于对照细胞[(83.5±7.78)vs(125±9.19)个,P＜0.01),pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞G1期比例明显升高[ (39.65±4.03)％ vs (29.35±1.00)％,P＜0.01].pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞的移植瘤生长速度较对照细胞移植瘤明显减慢[细胞接种33 d,(46.14±12.94) vs (228.12±94.86) mm3,P＜0.01].结论:干扰KLF4的表达可抑制肿瘤干细胞T3A-A3的自我更新及其在体内外的增殖潜能.

关键词：Krüppel样因子4(KLF4)、RNA干扰、肝癌、肿瘤干细胞、T3A-A3、自我更新、增殖

所属期刊栏目：18

分类号：R735.7;Q279(肿瘤学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划资助项目2009CB521804

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：368-372