重组EBV壳抗原BALF4蛋白的制备及其在鼻咽癌患者检测中的应用

摘要：

目的:制备重组EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)壳抗原(viral capsid antigen,VCA)BALF4蛋白,并探讨其在鼻咽癌检测中的应用价值.方法:采用PCR法从EBV DNA序列中扩增BALF4基因,酵母表达载体pPICZaA连接,重组pPICZαA-BALF4载体转染GS115酵母菌,甲醇诱导重组BALF4蛋白表达并纯化.重组BALF4蛋白经SDS-PAGE、Western blotting鉴定后作为包被抗原,制备ELISA试剂,检测鼻咽癌患者EBV-IgA抗体.结果:成功构建pPICZαA-BALF4表达载体,并在GS115酵母菌中高效地表达重组BALF4蛋白.重组BALF4蛋白相对分子质量为52 000,经Western blotting证实重组BALF4蛋白具有免疫原性.重组BALF4蛋白作为包被抗原,检测鼻咽癌患者和正常对照血清(各300份)中EBV-IgA抗体的灵敏度和特异性分别为81%和94%.结论:成功制备重组EB病毒壳抗原BALF4蛋白,该蛋白在鼻咽癌血清筛选具有较高的敏感度及特异性.

关键词：鼻咽肿瘤、EB病毒、壳抗原、BALF4

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分类号：R739.63;R446.62;R730.4(肿瘤学)

资助基金：上海高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金37-0111-08-003;上海大学创新基金11-0111-09-08

在线出版日期：2011-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：648-652